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HEPENGBIO細菌F型ATP酶(F type ATPase )活性酶連續反應光度法定量檢測試劑盒產品說明書
主要用途
HEPENGBIO細菌F型ATP酶(F type ATPase )活性酶連續反應光度法定量檢測試劑是一種旨在使用F型ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續循環法反應系統,在寡霉素參與下,測定與ATP合成對應的ATP水解產生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測定樣品中酶活性的方法。其適合于各種細菌細胞F型ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
技術背景
腺苷三磷酸酶,又稱為ATP酶(adenosine triphosphatase;ATPase或ATP phosphohydrolase;EC3.6.1.3),屬于磷酸水解酶,可以催化含磷的酸酐分解,即催化三磷酸腺苷分解為二磷酸腺苷和無機磷。ATP酶的去磷酸化反應釋放出能量,成為細胞生命代謝的能源。ATP酶為跨膜蛋白(transmembrane),幫助傳輸各種代謝分子進出細胞。根據ATP酶的結構和功能,分為五類不同的ATP酶,即F、V、A、P和E型。P型,又稱為E1E2 型,存在于細菌和真核細胞膜和細胞器上,其功能在于水解ATP獲得能量,跨膜運輸各種化學分子,包括Ca2+傳輸性、Na+-K+ /H+-K+傳輸性、H+傳輸性和所有細菌型等,其中胃氫/鉀ATP酶,一種與胃酸分泌相關的質子泵,屬于這一類型。V型,又稱為V1V0型,主要存在于真核細胞的液泡(vacuole)中。A型,又稱為A1A0型,存在于古生菌(archaea)中。E型,為細胞表面的酶。V型,又稱為V1V0型,也稱為氫V型ATP酶,主要存在于所有真核細胞的囊泡(vacuole或vesicle)中。F型ATP酶(F type ATPase),又稱為ATP合成酶(ATP synthase)、F1F0 ATP酶(F1F0 ATPase)和線粒體呼吸鏈復合物V(complex V),主要在線粒體、葉綠體或細菌細胞膜上,進行氧化磷酸化或光合作用。細菌質膜型F型ATP酶主要有兩個結構域:F0為質子轉運通道,由3個膜蛋白構成,包括a、b、c等;和F1催化活性結構域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構成。其最特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。細菌F型ATP酶的主要功能通過ATP合成的逆向反應,水解ATP,產生膜內外質子梯度變化,幫助細菌離子轉運和鞭毛運動(flagella motility)。基于ATP,在寡霉素參與下,受到F型ATP酶的水解,進而通過丙酮酸激酶(pyruvate kinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase;LDH)反應系統中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)轉化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD),產生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F型 ATP酶活性。其反應系統為:
F-type ATPase
ATP → ADP + Pi
pyruvate kinase
Phosphoenolpyruvate + ADP → pyruvate + ATP
actate dehydrogenase
pyruvate + NADH → lactate + NAD+
(高吸收峰) (低吸收峰)
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融;HEPENGBIO反應液(Reagent D),避免光照,有效保證6月
用戶自備
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管:用于樣品操作和保存的容器
(微型)臺式離心機:用于樣品操作
恒溫搖床:用于細菌培養
培養箱:用于反應孵育
比色皿:用于光度分析的容器
分光光度儀:用于光度分析
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HEPENGBIO細菌F型ATP酶(F type ATPase )活性酶連續反應光度法定量檢測試劑盒產品說明書
主要用途
HEPENGBIO細菌F型ATP酶(F type ATPase )活性酶連續反應光度法定量檢測試劑是一種旨在使用F型ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續循環法反應系統,在寡霉素參與下,測定與ATP合成對應的ATP水解產生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測定樣品中酶活性的方法。其適合于各種細菌細胞F型ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
技術背景
腺苷三磷酸酶,又稱為ATP酶(adenosine triphosphatase;ATPase或ATP phosphohydrolase;EC3.6.1.3),屬于磷酸水解酶,可以催化含磷的酸酐分解,即催化三磷酸腺苷分解為二磷酸腺苷和無機磷。ATP酶的去磷酸化反應釋放出能量,成為細胞生命代謝的能源。ATP酶為跨膜蛋白(transmembrane),幫助傳輸各種代謝分子進出細胞。根據ATP酶的結構和功能,分為五類不同的ATP酶,即F、V、A、P和E型。P型,又稱為E1E2 型,存在于細菌和真核細胞膜和細胞器上,其功能在于水解ATP獲得能量,跨膜運輸各種化學分子,包括Ca2+傳輸性、Na+-K+ /H+-K+傳輸性、H+傳輸性和所有細菌型等,其中胃氫/鉀ATP酶,一種與胃酸分泌相關的質子泵,屬于這一類型。V型,又稱為V1V0型,主要存在于真核細胞的液泡(vacuole)中。A型,又稱為A1A0型,存在于古生菌(archaea)中。E型,為細胞表面的酶。V型,又稱為V1V0型,也稱為氫V型ATP酶,主要存在于所有真核細胞的囊泡(vacuole或vesicle)中。F型ATP酶(F type ATPase),又稱為ATP合成酶(ATP synthase)、F1F0 ATP酶(F1F0 ATPase)和線粒體呼吸鏈復合物V(complex V),主要在線粒體、葉綠體或細菌細胞膜上,進行氧化磷酸化或光合作用。細菌質膜型F型ATP酶主要有兩個結構域:F0為質子轉運通道,由3個膜蛋白構成,包括a、b、c等;和F1催化活性結構域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構成。其最特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。細菌F型ATP酶的主要功能通過ATP合成的逆向反應,水解ATP,產生膜內外質子梯度變化,幫助細菌離子轉運和鞭毛運動(flagella motility)。基于ATP,在寡霉素參與下,受到F型ATP酶的水解,進而通過丙酮酸激酶(pyruvate kinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase;LDH)反應系統中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)轉化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD),產生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F型 ATP酶活性。其反應系統為:
F-type ATPase
ATP → ADP + Pi
pyruvate kinase
Phosphoenolpyruvate + ADP → pyruvate + ATP
actate dehydrogenase
pyruvate + NADH → lactate + NAD+
(高吸收峰) (低吸收峰)
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融;HEPENGBIO反應液(Reagent D),避免光照,有效保證6月
用戶自備
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管:用于樣品操作和保存的容器
(微型)臺式離心機:用于樣品操作
恒溫搖床:用于細菌培養
培養箱:用于反應孵育
比色皿:用于光度分析的容器
分光光度儀:用于光度分析