.jpg.jpg)
本公司所有產品僅供實驗室科學研究使用，不得用于醫療診斷，食品，化妝品和其他用途。
產品信息價格說明書等相關資料，可以聯系客服咨詢索取。
HEPENGBIO體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒
產品說明書
主要用途
HEPENGBIO體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑是一種旨在通過熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽，受到活性氧的氧化下，產生熒光，來定量檢測活性氧族的生成和增加的方法。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養學等的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡易，性能穩定。
技術背景
超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）、過氧化氫（hydrogen peroxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）、過氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、單線態氧氣（singlet oxygen）等細胞內活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的產生和增多，將導致細胞衰老或凋亡。活性氧特異性探針熒光染料2',7'-二氯熒光乙酰乙酸鹽（2',7'-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA），一旦被過氧化氫、羥自由基或氫氧基、過氧化基、次氯酸等氧化，便產生熒光。據此測定活性氧族的濃度。
產品內容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 5毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent B） 50微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent C） 1毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，嚴格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
抗凝管：用于采血儲存的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作和工作液配制的容器
培養箱：用于反應孵育
（微型）臺式離心機：用于樣品操作
黑色96孔板：用于樣品熒光染色的容器
熒光分光光度儀或熒光酶標儀：用于熒光定量分析
實驗步驟
一、 樣品準備
選擇一：血漿樣品
1． 準備好抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）
2． 抽取1毫升血液，置于抗凝管里
3． 放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）
5． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升上述制備的血漿到新的1.5毫升離心管
7． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇二：血清樣品
1． 準備好不含抗凝劑的儲存管
2． 抽取1毫升血液，置于儲存管里
3． 室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結
4． 放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為2000g（或5000RPM，例如eppendorf 5415）
5． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）
6． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
7． 移取10微升上述制備的血清到新的1.5毫升離心管
8． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
9． 放在冰槽里待測
選擇三：尿液/腦脊液/唾液/精液樣品
1． 準備好1.5毫升離心管
2． 移取1毫升液體到離心管
3． 放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
5． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
7． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇四：細胞培養上清
1． 準備1瓶25cm2細胞培養瓶的新鮮待測細胞
2． 小心移取細胞培養液到15毫升錐形離心管
3． 放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為300g
4． 小心移取上清液到新的15毫升錐形離心管
5． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
6． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
7． 放在冰槽里待測
8． 放進37℃培養箱里備用（1小時內）
二、 樣品測定
實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液（Reagent B）置于手心融化，HEPENGBIO稀釋液（Reagent C）放進37℃恒溫水槽里預熱。然后移出10微升HEPENGBIO染色液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入90微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent C），混勻后，標記為HEPENGBIO染色工作液，置入暗室里。然后進行下列操作。
1． 準備1個黑色96孔板
2． 加入100微升上述制備的待測樣品
3． 加入10微升HEPENGBIO染色工作液
4． 輕輕搖動黑色96孔板，混勻
5． 放進37℃細胞培養箱里孵育20分鐘
6． 即刻放進熒光酶標儀檢測：（激發波長490nm，散發波長530nm）――RFU增高，表明活性氧族（ROS）含量高
注意事項
1． 本產品為50次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 孵育時，避免光照
4． 測試前，細胞培養液須新鮮收集，1小時內為最佳
5． 培養液上清須澄清
6． 如果測定體系變化，則試劑用量相應變化
7． 建議染色完成后，即刻進行熒光分析
8． 用戶可以使用維生素E作為陰性對照
9． 本公司同時提供體液活性氧高質熒光測定試劑盒，滿足不同用戶需求
10． 本公司提供系列活性氧分析試劑產品
產品信息價格說明書等相關資料，可以聯系客服咨詢索取。
HEPENGBIO體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒
產品說明書
主要用途
HEPENGBIO體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑是一種旨在通過熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽，受到活性氧的氧化下，產生熒光，來定量檢測活性氧族的生成和增加的方法。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養學等的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡易，性能穩定。
技術背景
超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）、過氧化氫（hydrogen peroxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）、過氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、單線態氧氣（singlet oxygen）等細胞內活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的產生和增多，將導致細胞衰老或凋亡。活性氧特異性探針熒光染料2',7'-二氯熒光乙酰乙酸鹽（2',7'-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA），一旦被過氧化氫、羥自由基或氫氧基、過氧化基、次氯酸等氧化，便產生熒光。據此測定活性氧族的濃度。
產品內容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 5毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent B） 50微升
HEPENGBIO稀釋液（Reagent C） 1毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，嚴格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
抗凝管：用于采血儲存的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作和工作液配制的容器
培養箱：用于反應孵育
（微型）臺式離心機：用于樣品操作
黑色96孔板：用于樣品熒光染色的容器
熒光分光光度儀或熒光酶標儀：用于熒光定量分析
實驗步驟
一、 樣品準備
選擇一：血漿樣品
1． 準備好抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）
2． 抽取1毫升血液，置于抗凝管里
3． 放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）
5． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升上述制備的血漿到新的1.5毫升離心管
7． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇二：血清樣品
1． 準備好不含抗凝劑的儲存管
2． 抽取1毫升血液，置于儲存管里
3． 室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結
4． 放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為2000g（或5000RPM，例如eppendorf 5415）
5． 小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）
6． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
7． 移取10微升上述制備的血清到新的1.5毫升離心管
8． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
9． 放在冰槽里待測
選擇三：尿液/腦脊液/唾液/精液樣品
1． 準備好1.5毫升離心管
2． 移取1毫升液體到離心管
3． 放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
4． 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
5． 即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存
6． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
7． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
8． 放在冰槽里待測
選擇四：細胞培養上清
1． 準備1瓶25cm2細胞培養瓶的新鮮待測細胞
2． 小心移取細胞培養液到15毫升錐形離心管
3． 放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為300g
4． 小心移取上清液到新的15毫升錐形離心管
5． 移取10微升到新的1.5毫升離心管
6． 加入90微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
7． 放在冰槽里待測
8． 放進37℃培養箱里備用（1小時內）
二、 樣品測定
實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的HEPENGBIO染色液（Reagent B）置于手心融化，HEPENGBIO稀釋液（Reagent C）放進37℃恒溫水槽里預熱。然后移出10微升HEPENGBIO染色液（Reagent B）到新的1.5毫升離心管，加入90微升HEPENGBIO稀釋液（Reagent C），混勻后，標記為HEPENGBIO染色工作液，置入暗室里。然后進行下列操作。
1． 準備1個黑色96孔板
2． 加入100微升上述制備的待測樣品
3． 加入10微升HEPENGBIO染色工作液
4． 輕輕搖動黑色96孔板，混勻
5． 放進37℃細胞培養箱里孵育20分鐘
6． 即刻放進熒光酶標儀檢測：（激發波長490nm，散發波長530nm）――RFU增高，表明活性氧族（ROS）含量高
注意事項
1． 本產品為50次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 孵育時，避免光照
4． 測試前，細胞培養液須新鮮收集，1小時內為最佳
5． 培養液上清須澄清
6． 如果測定體系變化，則試劑用量相應變化
7． 建議染色完成后，即刻進行熒光分析
8． 用戶可以使用維生素E作為陰性對照
9． 本公司同時提供體液活性氧高質熒光測定試劑盒，滿足不同用戶需求
10． 本公司提供系列活性氧分析試劑產品
