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赫澎(上海)生物科技有限公司
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純化線粒體氧化應激活性氧(ROS)MitoSOX紅色熒光測定試劑盒(超氧陰離子superoxide)
產品編號 HPBIO-JM1010
中文名稱: 純化線粒體氧化應激活性氧(ROS)MitoSOX紅色熒光測定試劑盒(超氧陰離子superoxide)
英文名稱:
本公司所有產品僅供實驗室科學研究使用,不得用于醫療診斷,食品,化妝品和其他用途。
產品信息價格說明書等相關資料,可以聯系客服咨詢索取。

HEPENGBIO純化線粒體氧化應激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測定試劑盒
產品說明書 
主要用途
HEPENGBIO純化線粒體氧化應激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測定試劑是一種旨在通過透膜熒光染色劑MitoSOX,在線粒體氧化損傷條件下,產生紅色熒光,來定量檢測線粒體內超氧陰離子活性氧族的生成和增加的方法。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養學等的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩定。
技術背景
超氧自由基陰離子(superoxide radical;O2-)、過氧化氫(hydrogen peroxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxyl radical;OH-)、過氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氫過氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、過氧亞硝基陰離子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、單線態氧氣(singlet oxygen)等細胞內活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的產生和增多,將導致細胞衰老或凋亡。其中線粒體氧化磷酸化副產物之一是超氧陰離子,為線粒體內最主要的活性氧族,與心血管疾病,包括高血壓、冠狀動脈硬化、糖尿病相關的血管疾病、神經退行性疾病(巴金森氏癥、阿茨罕默癥、肌萎縮硬化癥)相關。MitoSOX是一種選擇性在線粒體內長期滯留而不外漏的染色劑。一旦被超氧自由基陰離子氧化,便產生熒光。據此證明線粒體內超氧陰離子活性氧族的存在。
產品內容
HEPENGBIO緩沖液(Reagent A)      3毫升
HEPENGBIO補充液(Reagent B)      3毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent C)     40微升
產品說明書 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,HEPENGBIO染色液(Reagent C),嚴格避免光照;有效保證6月
用戶自備
黑色96孔板:用于樣品操作的容器
培養箱:用于染色孵育
(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光線粒體
熒光酶標儀:用于測定線粒體熒光強度
實驗步驟
實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑放進冰槽里融化,避免光照;同時從-80℃冰箱里取出待測的線粒體,放進冰槽里融化。然后進行下列操作。
1. 準備1個黑色96孔板,標記好背景對照孔和待測樣品孔
2. 分別加入150微升HEPENGBIO緩沖液(Reagent A)
3. 移取50微升線粒體懸液(總量為50微克線粒體蛋白)到黑色96孔板的相應待測樣品孔里
4. 加入50微升HEPENGBIO補充液(Reagent B)到黑色96孔板的相應背景對照孔里
5. 分別加入2微升HEPENGBIO染色液(Reagent C)到上述孔里
6. 放進37℃培養箱里孵育15分鐘,避免光照
7. 選擇下列方式之一進行操作:
a) 使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):
1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片
 2)激發波長510nm,散發波長580nm――
紅色熒光增強,表明超氧陰離子含量高
b) 或使用熒光酶標儀檢測(定量檢測):
1)直接放進熒光酶標儀:激發波長510nm,散發波長580nm――
樣品RFU-對照RFU=實際線粒體RFU:增高,表明超氧陰離子含量高
注意事項
1. 本產品為20次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 孵育時,須避免光照
4. 建議染色完成后,即刻進行熒光分析
本公司提供系列活性氧檢測試劑產品
 
檢測報告(COA)
使用說明
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