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赫澎(上海)生物科技有限公司
HePeng(Shanghai)Biotech.,Ltd.
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冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒
產品編號 HPBIO-JM4733
中文名稱: 冰凍切片細胞色素C氧化酶活性染色試劑盒
英文名稱:
品牌: 赫澎生物
規格型號: 50次
本公司所有產品僅供實驗室科學研究使用,不得用于醫療診斷,食品,化妝品和其他用途。
產品信息價格說明書等相關資料,可以聯系客服咨詢索取。
HEPENGBIO冰凍切片細胞色素氧化酶活性染色試劑盒產品說明書
主要用途
HEPENGBIO冰凍切片細胞色素氧化酶活性染色試劑是一種旨在使用細胞色素C催化人工電子供體染料二氨基聯苯胺的非酶源性自然氧化,形成棕褐色不溶性產物,來分析冰凍組織樣品中細胞色素氧化酶活性的方法。主要適用于動物組織細胞的細胞色素氧化酶活性的定性檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,顯色清晰。
技術背景
細胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase)是氧化呼吸鏈的酶部分的總稱。其存在于真核生物的細胞線粒體上,主要通過氧化磷酸化為細胞提供能量。二氨基聯苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)是人工電子供體染料,通過與金屬蛋白,例如含鐵蛋白細胞色素C中的物理性結合,產生非酶源性自然氧化,同時提供電子(細胞色素C作為電子受體)于呼吸鏈的電子傳遞系統,由此呈現出顏色變化和沉積,形成棕褐色不溶性產物,且不受乙醇影響。在DAB自然氧化的同時,產生活性氧,例如過氧化氫,由過氧化氫酶防止其聚集。在大量氧化型DAB的存在下,通過細胞色素氧化酶的作用,亞鐵細胞色素C被氧化成正鐵細胞色素C。由此氧化型DAB棕褐色不溶性產物被用于檢測組織細胞中細胞色素氧化酶的活性。
產品內容
HEPENGBIO清理液(Reagent A)  100毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent B)      10毫升
HEPENGBIO反應液(Reagent C)    4瓶
HEPENGBIO固著液(Reagent D)   10毫升
產品說明書    1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液(Reagent B)和HEPENGBIO反應液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
培養箱:用于反應孵育
中性樹脂:用于切片封片
光學顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實驗步驟
染色開始前,將-20℃冰箱里的試劑置于室溫下融化;移取2.5毫升HEPENGBIO染色液(Reagent B)到1瓶HEPENGBIO反應液(Reagent C)里,混勻,標記為HEPENGBIO反應工作液,置于冰槽里,避免光照。
1. 取出待測的10至15微米厚的冰凍組織切片 
2. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
4. 小心加上200微升 HEPENGBIO反應工作液,鋪滿整個切片樣品表面
5. 放進37℃培養箱里孵育60分鐘,避免光照
6. 小心移去切片上的HEPENGBIO反應工作液
7. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
9. 重復實驗步驟6至8二次
10. 小心加上200微升HEPENGBIO固著液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
11. 室溫下孵育15分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO固著液(Reagent D)
13. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
14. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
15. 重復實驗步驟13至14二次
16. (選擇步驟)復染(建議使用HEPENGBIO蘇木素復染試劑盒)
17. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
18. 即刻在光學顯微鏡下觀察和計數:表達細胞色素氧化酶活性的組織細胞為陽性組織細胞,呈現棕色。
 
檢測報告(COA)
使用說明
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