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赫澎(上海)生物科技有限公司
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人體血小板高純分離試劑盒
產品編號 HPBIO-JM12732
中文名稱: 人體血小板高純分離試劑盒
英文名稱:
HEPENGBIO人體血小板高純分離試劑盒產品說明書
主要用途
HEPENGBIO人體血小板高純分離試劑是一種旨在通過等密度離心的方法,直接從人體全血樣品中分離出結構完整而高度純化的血小板組分的方法。適合于人體(生理或病理)血小板的制備。其制備物產量高,活性保證,純度可達99%。可以被用于凝集試驗、功能檢測等研究。產品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩定,分離產量和純度保證。
技術背景
血小板(platelet),又稱為凝血細胞(thrombocytes),是一種小而形狀規則的細胞片段,直徑2至3微米。其前體為巨核細胞(megakaryocytes),平均生命周期5至9天。血小板在止血過程(hemostasis)中起著重要作用,幫助形成血液凝塊,同時也是多種生長因子,包括血小板源生長因子(platelet-derived growth factor)、轉化生長因子β(transforming growth factor-β;TGF-β)、堿性纖維原細胞生長因子(basic fibroblast growth factor;bFGF)等的自然來源。體內血小板數量和功能異常會產生血小板病(thrombocytopathy):血小板過低(thrombocytopenia)或功能降低(thrombasthenia),將導致出血;過高(thrombocytosis)則容易產生血塊,而引起中風、心肌梗塞、肺栓塞(embolism)。血小板的分離是現代血液學研究的最常用的手段之一。福特(Ford)等使用等密度介質(1.063克/毫升),通過低速離心,一步從紅細胞和白細胞中獲得純度更高、活性保證、結構完整的血小板。 
產品內容
HEPENGBIO高純液(Reagent A)   毫升
HEPENGBIO稀釋液(Reagent B)   毫升
產品說明書   1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO高純液(Reagent A),避免光照;嚴格無菌操作;有效保證6月
 
用戶自備
 
2毫升離心管:用于樣品操作的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
4℃(微型)臺式離心機:用于樣品操作
 
實驗步驟
 
1. 準備1個無菌的15毫升錐形離心管
2. 搖勻試劑盒里的HEPENGBIO高純液(Reagent A)
3. 移出xx毫升HEPENGBIO高純液(Reagent A)到15毫升錐形離心管
4. 加入xx毫升HEPENGBIO稀釋液(Reagent B),混勻——此為HEPENGBIO高純工作液
5. 小心沿著管壁,在HEPENGBIO高純工作液上面,一滴一滴加入5毫升新鮮抗凝全血樣品
6. 室溫下,放進4℃臺式離心機離心15分鐘,速度為350g(注意:避免使用快速制動)
7. 小心取出離心管:可見上端二分之一處黃色血漿和下端四分之一處紅色血細胞之間的混濁血小板樣品帶
 
8. 小心抽去血小板樣品帶以上的血漿液體
9. 小心收集血小板樣品帶到2毫升離心管(注意:置于血漿和血小板樣品帶交界處下緣小心緩慢抽吸)——
10. 放進4℃微型臺式離心機離心20分鐘,速度為2000g
11. 小心抽去上清液 
12. (選擇步驟)加入xx至xx毫升HEPENGBIO稀釋液(Reagent B)
13. (選擇步驟)放進微型離心機離心20分鐘,速度為2000g
14. (選擇步驟)小心抽去上清液
15. 加入xx微升HEPENGBIO稀釋液(Reagent B),混勻
16. 放進-70℃冰箱里保存
 
注意事項
 
1. 本產品為10次(5毫升全血/次)操作
2. 操作時,避免污染母液,尤其是HEPENGBIO高純液(Reagent A) 
3. 操作時,須戴手套
4. 建議使用新鮮抗凝全血
5. 全血樣品采集建議使用EDTA二鉀血液抗凝液 或ACD血液抗凝液 , 
6. 建議使用足夠的樣品量
7. 血小板提取量因人而異;如果不足,建議增加全血量
8. 本產品所獲得的線粒體純度(可達到99%)和產量最為理想
9. 使用HEPENGBIO高純液(Reagent A)前,須搖勻后加入
10. HEPENGBIO高純工作液最低使用量為5毫升。大于5毫升血液樣品,與HEPENGBIO高純工作液1:1比例
11. 離心減速時,不得使用制動方式
12. 為了避免紅細胞和白細胞污染,抽吸血小板樣品帶時,留出2至3毫米紅細胞與血小板交界處的液體(上圖藍色部分)
13. 每毫升全血平均可獲得2 X 108血小板
14. 本公司提供系列血小板試劑產品
檢測報告(COA)
使用說明
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使用說明
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