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赫澎(上海)生物科技有限公司
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組織鈣調蛋白(CaM)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
產品編號 HPBIO-JM6588
中文名稱: 組織鈣調蛋白(CaM)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
英文名稱:
HEPENGBIO組織鈣調蛋白(CaM)活性酶連續循環反應光度法定量檢測試劑盒產品
說明書
主要用途
HEPENGBIO組織鈣調蛋白(CaM)活性酶連續循環反應光度法定量檢測試劑是一種旨在通過鈣調蛋白依賴性cAMP磷酸二酯酶、肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶連續反應系統中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法來測定組織裂解樣品中鈣調蛋白活性的方法。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體、昆蟲等)鈣調蛋白的活性,以及抑制劑和調節劑檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。
技術背景
鈣調蛋白(calmodulin;CaM)屬于鈣結合蛋白家屬中EF手型(EF hand)蛋白類之一,在所有真核細胞內表達,分布在各種不同的亞細胞結構中。鈣調蛋白是一種熱穩定小分子酸性蛋白,含有148氨基酸,16.7Kd大小,4個EF手型模式(motif)。鈣調蛋白通過EF手型,與鈣離子結合,產生構型變化,進而與各種蛋白結合,或反之,其它蛋白通過結合鈣調蛋白形成復合物結合鈣離子,引起一系列信號反應機制,調節機體內炎癥反應、代謝、凋亡、平滑肌收縮、胞內運動、短時或長時記憶、神經生長和免疫反應等,更是鈣離子感受器和調控緩沖分子。基于腺苷-3',5'-環化一磷酸磷酸二酯酶(cyclic adenine monophosphate phosphodiesterase;cAMP PDE;EC3.1.4.17 )是鈣調蛋白依賴性。鈣調蛋白激活磷酸二酯酶催化環核苷酸(cAMP)的磷酸二酯鍵(phosphodiester bond)的水解,產生1-磷酸腺苷,進而通過肌激酶(myokinase)、 丙酮酸激酶(pyruvate kinase)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase)系統,測定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)轉化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)的吸光峰值的變化(340nm 波長),來定量分析鈣調蛋白的活性。其連續循環反應系統為:
 
     phosphodiesterase 
cAMP  +  H2O     →      AMP  
calmodulin
 
myokinase
AMP  +  ATP  →  2 ADP
 
pyruvate kinase
2 ADP  + 2 phosphoenolpyruvate   →    2 ATP  +  2 pyruvate   
 
lactate dehydrogenase 
2 pyruvate  +  2 NADH    →  2 lactate  +  2 NAD+ 
(高吸收峰) (低吸收峰)
產品內容
HEPENGBIO清理液(Reagent A)     60毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B)     10毫升
HEPENGBIO緩沖液(Reagent C)     10毫升
HEPENGBIO反應液(Reagent D)     500微升
HEPENGBIO酶促液(Reagent E)     500微升
HEPENGBIO底物液(Reagent F)   250微升
HEPENGBIO陰性液(Reagent G)   500微升
產品說明書         1份
 
保存方式
 
保存HEPENGBIO清理液(Reagent A)保存在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;HEPENGBIO反應液(Reagent D)避免光照;有效保證6月
 
用戶自備
 
1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器
DOUNCE勻漿器:用于細胞勻化
(微型)臺式離心機:用于樣品操作
200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析的容器
分光光度儀或酶標儀:用于光度分析
檢測報告(COA)
使用說明
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